構造解析クックブック

COOTクックブック  

既に全てを把握できないほどの機能が追加されつつあるCOOT。ここではターゲットをCOOTに絞ってクックブックを作成してみます。これまでのページはリファレンス的に機能を網羅していましたが、クックブックでは機能を軸に解説していきます。思い付いたときに少しずつ追加していこうと思います。
構造解析全般のTipsに関しては構造解析クックブックを参照してください。

全般  

日本語ディレクトリ以下で実行するとエラー  

2010-03-01

問題
日本語のディレクトリでCOOTを実行すると以下のメッセージが出てファイルが扱えない

Gtk-Message: The filename "\350..." couldn't be converted to UTF-8. (try setting the environment variable G_FILENAME_ENCODING): Invalid byte sequence in conversion input

解法
たまたま日本語ファイル名のディレクトリで作業しているときに気づいたのですが、日本語のディレクトリ以下(例えば、論文準備というディレクトリ)でCOOTを起動してファイルを開こうとするとエンコーディングのエラーと思われるメッセージが出力され、日本語ディレクトリが見えなくなります。そんな時はエラーメッセージで指摘されているように環境変数G_FILENAME_ENCODINGにファイル名のエンコーディングを指定します。Vine5などではUTF-8なので、 
% setenv G_FILENAME_ENCODING utf-8
とセットしてからCOOTを再起動します(cshの場合。shならexport G_FILENAME_ENCODING=utf-8)。
これで日本語ファイルも扱えるはずです。

モデリング  

原子間の距離を表示させたい  

解法

状況によっていくつかの方法があり、

解説
状況に使い分けることが使いこなしへのポイントです。水分子を置くときは[Pointer Distances]、後から水分子の位置を検証するときは[Environment Distances]を使うのがよいでしょう。初期設定では[Pointer Distances]と[Environment Distances]の表示範囲距離が異なっています(3.6Åおよび3.2Å)ので注意して下さい。
また、リガンドを配置するときに便利なDynamic Distanceという機能もありますので使ってみてください。
参考

対称分子の近くに配置した水を元の分子の近くに移したい  

2010-03-09 : Ver.0.6

問題
対称で発生させたタンパク分子の近くに配置した水分子を元の分子の周りに配置し直したい
解法
Extensionsのコマンドを使います。

このコマンドを使うとファイル単位で処理を行うことができます。PDB登録する前にはしておきたい処理ですね。

リガンド  

定義済みのリガンドを読み込みたい  

問題
リガンドをモデリングするのに低分子を読み込みたい。ただし、その分子は標準のライブラリ($CLIB_MON/mon_lib.list)に定義されているようだ。
解法
[File] -> [Get Monomer...]で化合物の3文字コードを入力するか、3文字コード(3-letter code)がわからない場合は[File] -> [Search Monomer Library..]で化合物名から検索して読み込みます。

上記の方法では読み込めなかった  

問題
PDBを見ているとそのリガンドの3文字コードが登録されているようなのだが、新しいためか標準のライブラリからは読み込めない。
解法
PDBのChemical Component Dictionaryを調べます。実際に化合物を取得するにはMDSchemまたはLigand ExpoからPDBファイルまたはSMILES記法を取得してインポートします。
解説
PDBでは3文字コードが登録されているのに標準のライブラリに入っていない化合物はwwPDB内のChemical Component Dictionaryから取得することになります。Chemical Component Dictionaryでは検索機能がないのでEMBL-EBI内のMDSchem(PDBeChem)またはRSCB内のLigand Expo(旧：Ligand Depot)で検索して取得します。
どちらを使っても結果は変わらないはずなので好みで選んでください(私はLigand Expoを使っています)。その後、方法が二つあります。
  1. SMILES記法をコピーする
    化合物の説明にSMILESという項目があります。このSMILESをコピーして[Files] -> [SMILES...]に張り付ければCOOTが化合物を構成し、必要なCIFも作成するようです。上記のPDBファイルとともに存在するCIFファイルでは結合情報などが定義されていないため、[Edit Chi Angles]が使用できませんが、SMILESから生成すると使用可能なようです。
  2. PDBファイルを取得する
    登録されている化合物のPDBを取得します。精密化にはCIFファイルも必要となるのですが、ここから取得したCIFファイルではエラーが出たので、結局CCP4のMAKECIFを使いました。MAKECIFではなくDundee大学のPRODRGサーバーを使うこともできます。
参考

Chemical Component Dictionary内で見つからなかった  

問題
Chemical Component Dictionaryを検索しても見つからず、PDBファイルやSMILESがわからない。
解法
自分で作成します。運がよければUppsala大学のHic-Upで見つかるかもしれません。
解説
ややこしい化合物などの場合、以前にPDBが作成されていない可能性があります。その時は似た化合物を元に自分で作成するか、CCP4のSKETCHER、PRODRGサーバーのSKETCHERなどを使って作成します。SMILES記法を理解しているならSMILESで作成するという方法もあります。
PDBが作成できれば後は上の方法と同様CIFファイルをMAKECIFまたはPRODRGで作成すればインポートできます。

よく使う化合物をモノマーライブラリに登録したい  

問題
これまでに解説した方法で化合物を読み込めたが、よく使うので[Get Monomer]で読み込みたい。
解法
元のPDBファイルからMAKECIFでCIFファイルを作成し、CCP4のモノマーライブラリに追加します。追加方法は以下の手順で行います。
  1. 追加するCIFファイルを$CLIBD_MONディレクトリにコピーします。この時、TRE.cifなら$CLIBD_MON/t/にコピーします。
  2. $CLIBD_MON/list/mon_lib_list.cifに化合物の説明を記述します。今回のTREならTrehaloseなので、 
    TRE      TRE 'TREHALOSE                           ' D-saccharide       45  23 .
    という行を追加します。追加する場所はどこでもよさそうですが、LIST OF MONOMERSセクションに追加してください。
    項目は、
    • 化合物ID(通常は3文字コードでよさそう。GLCなどは別名が記述されているが詳細は不明)
    • 3文字コード(すでに存在するものと重複しないように)
    • 化合物の説明
    • 化合物の種類。ここでは二糖類なのでD-saccharide。似た化合物を参考に。
    • 水素原子を含む原子の数
    • 水素原子以外の原子の数
参考